通过不同温度的生物培养箱培养，可以观察愈伤组织与温度的关系。一般温度在15度以下时，愈伤组织生长很缓慢；在15度-20度时愈伤组织加快；在20度-30度时，愈伤组织生长最快。但是，愈伤组织生长的最适宜温度，不同的树种间是有所差异：杏树愈伤组织生长的最适宜温度在20度左右；樱桃树、桃树和李树的愈伤组织生长的最适宜温度是23度左右；梨树、苹果树、山楂树、石榴树愈伤组织生长的最适宜温度在25度左右；栗子树、核桃树愈伤组织生长的最适宜温度是在27度左右；柿子树、枣树的愈伤组织在近30度时生长最快。所有树种的愈伤组织，在30度以上的温度下生长缓慢，如果温度超过35度，则停止生长。常绿树种如柑桔、荔枝在25--30度的温度条件下，其愈伤组织生长最快。
从以上的情况中可以看出一个规律：落叶果树春季芽萌发早的，其愈伤组织生长所需要的温度低一些；芽萌发晚的，其愈伤组织所需要的温度高一些。在北方地区，主要果树芽萌发的次序为：樱桃、山杏、山桃、桃、李、海棠、梨、苹果、山楂、栗子、核桃、柿子、枣。所以，北方地区果树春季嫁接的适宜时期，也应和以上所述的果树芽萌发次序相一致。嫁接过早或过晚，都不利于愈伤组织的形成。在果树生长期进行芽接，温度一般是合适的,为了避免高温，以秋季嫁接为最好。嫁接后，要避免接芽部位被太阳光直晒，
2、湿度
湿度对愈伤组织的形成影响很大，当接口周围干燥时，伤口大量蒸发水分，细胞干枯死亡，不能形成愈伤组织，这往往是嫁接失败的重要原因。愈伤组织的生长情况如何，是嫁接成活的关键；而保持适宜的湿度，又是形成愈伤组织的关键。所以，保持伤口湿度实际上是嫁接成活的关键。
只有在接口处空气湿润，相对湿度接近饱和的情况下，愈伤组织才能很快形成。
近年来，随着塑料薄膜的应用，都用它来包扎接口，能很好的保持湿度，又能将砧木和接穗捆紧，而且操作简便、省工，从而大大提高了嫁接成活率
3、空气
是植物生长必不可少的条件，有些树种如核桃和葡萄，春季嫁接时伤口有伤流液，影响通气。因此应采取措施控制伤流液，以保证愈伤组织生长，以前嫁接，用接蜡将伤口封住，以保持水分不蒸发，但妨碍通气，影响嫁接成活率，
植物的接口需要的空气量并不多，一般用塑料袋或塑料条捆绑，并不完全隔绝空气，愈伤组织就能正常生长
4、黑暗
黑暗也是影响愈伤组织生长的因素。据观察，愈伤组织在黑暗中生长比在光照下生长要快3倍以上，而且在黑暗中生长的愈伤组织白而嫩，愈合能力强。在光照下生长的愈伤组织易老化，有时还产生绿色组织，愈合能力没有前者好。
为了观察了解黑暗对愈伤组织生长的影响，可进行以下两种嫁接对比：一种是接口不抹泥，处于光照条件下；另一种是接口抹泥，而后又用塑料袋套起来保持湿度。嫁接半个月后，打开伤口观察，从以上情况中可以看出，抹泥保持黑暗条件的伤口，愈伤组织生长快而多；不抹泥处于光照下的伤口，愈伤组织生长慢而少。抹泥的不能太湿。如果太湿，泥浆流入伤口，就会影响成活。因此，嫁接时抹伤口必须用较干的泥，或者用湿土也行。
嫁接时，砧木与接穗的愈合主要不在表面。如果嫁接技术较好，接合严密时，双方连接部位一般都能处于黑暗条件之下。比如芽接时，芽片内侧和砧木伤口的外侧是贴紧的；枝接时，接穗插入部分或贴合部分也基本处于黑暗条件下。所以，除了套袋的先抹泥以外，其余用塑料条捆绑的，可以不抹泥。当然，如果在接口涂些湿土再缠塑料条，这样嫁接效果会更好。
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